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western blot實驗

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western blot實驗

服務簡介

Western blot技術的一般步驟是將經過SDS-PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。由于Western blot檢測技術結合了凝膠電泳的高分辨率和固相免疫測定的特異敏感等多種特點,因此可檢測到1-5 ng (低可到10-100 pg)中等大小的靶蛋白。同時,Western blot技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

western blot實驗

應用范圍

1、半定量或定性檢測細胞或組織中目標蛋白的表達情況;

2、從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質;

3、蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后續分析,并結合組分分離技術,檢測目標蛋白的定位情況,為免疫熒光實驗的補充;

4、在后基因組時代,將與質譜和蛋白質芯片等其他技術一起相互配合,發揮更重要的作用。

服務流程

 Western Blot是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。Western Blot的操作步驟主要包括:蛋白樣品收集,電泳,轉膜,封閉,一抗孵育,二抗孵育,底物顯色等過程。

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